Obtención de micelio de Agaricus bisporus

CUADERNO DE PRÁCTICAS

1- Objetivo:

Obtención de micelios de Agaricus Bisporus.

2-Materiales:

• Dos tipos de trigo.
• Olla a presión.
• Rejilla.
• Agua.
• Frascos esterilizados.
• Alcohol.
• Campana estéril de siembra.
• Placa Petri con cepa.
• Recipiente de agua esterilizada.
• Bisturí.
• Etiquetas.
• Agua.
• Alcohol.

3-Método:

• Se coloca en los frascos esterilizados, la semilla de trigo (dos variedades). Aproximadamente un poco menos de la mitad de su capacidad.
• Se agrega agua.
• Se tapan los frascos dando sólo una vuelta y media a la rosca.
• En la olla de presión, se coloca una rejilla metálica y se le añade agua, hasta la altura de la rejilla.
• Cuando el agua de la olla esté hirviendo, coloque los frascos en el interior sobre la rejilla metálica y tape la olla sin colocar el tapón de seguridad (válvula).
• Cuando salga el vapor fuertemente, coloque la válvula( esto mantendrá la presión interior de la olla).
• Una vez que pueda abrir la olla, cierre bien los frascos y agítelos fuertemente.
• Deje enfriar los frascos a temperatura ambiente.
• Con el bisturí esterilizado tomar uno o varios fragmentos de micelio de la cepa.
• Introducir los fragmentos de micelio en agua y remover.
• Introducir la solución en el frasco con el trigo.
• Agitar el frasco inoculado, procurando que los trozos de micelio no queden adheridos a las paredes del frasco.
• Colocar una etiqueta al frasco, anotando tipo de sustrato, fecha de inoculación, hora, y clave de la cepa inoculada.
• Los frascos deben colocarse en un sitio oscuro y a temperatura estable.
• Agitar los frascos cada dos o tres días.